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在DIN / ISO標(biāo)準(zhǔn)中,字段的對(duì)象側(cè)上的深度被定義為“物體面的兩側(cè)上的空間內(nèi)的軸向深度,可以移動(dòng)對(duì)象圖像中沒有檢測(cè)到損失銳度,而的圖像平面的位置和物鏡維持“。
但是,標(biāo)準(zhǔn)的不給任何線索如何衡量檢測(cè)閾值惡化的焦點(diǎn)。作者發(fā)表的主題明顯經(jīng)驗(yàn)豐富的景深是貝雷,早在1927年出版了他廣泛的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。貝雷公式給出的視覺景深的實(shí)用價(jià)值,因此一直沿用到今天。在其簡(jiǎn)化的形式,如下所示:
? VIS = N [λ/(2×NA²)+ 340um/(NA×M TOT VIS)]
? VIS:視覺經(jīng)驗(yàn)的深度的領(lǐng)域,n:折射率介質(zhì)中的對(duì)象是位于。如果對(duì)象被移動(dòng)時(shí),輸入的介質(zhì)的折射率,形成不斷變化的工作距離在方程。λ:所用的光波長(zhǎng),為白色光,λ= 0.55微米,NA:數(shù)值孔徑的對(duì)象側(cè)上,M TOT VIS:總VIS視覺放大倍率的顯微鏡
如果在上面的方程中,有效的放大倍數(shù)(M TOT VIS = 500 1000×NA)的關(guān)系的總的視覺倍率被替換,可以看出,個(gè)近似值,景深的平方成反比的數(shù)值孔徑。
特別是在低放大倍數(shù),景深可以顯著地增加,通過停止下來,即減少的數(shù)值孔徑。這通常是用在共軛平面上的孔徑光闌或隔膜。然而,較小的數(shù)值孔徑,較低的橫向分辨率。
因此它是一個(gè)問題,找到平衡,根據(jù)該對(duì)象的結(jié)構(gòu)的分辨率和景深。現(xiàn)代光學(xué)顯微鏡的高分辨率目標(biāo)(高NA)和可調(diào)光圈隔膜,實(shí)現(xiàn)靈活的匹配要求的特定的樣品的光學(xué)。在體視顯微鏡的情況下,往往是必要的z維度的三維結(jié)構(gòu)作出了一定的妥協(xié)贊成較高的景深,頻繁地要求。