膠體金,是金的一種存在狀態(tài),是氯金酸在還原劑作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負電的疏水膠溶液。免疫膠體金技術(shù)是以膠體金為標志物,利用特異性抗原抗體反應(yīng),在光鏡電鏡下對抗原或抗體物質(zhì)進行定位,定性乃至定量研究的標記技術(shù)。
免疫膠體金的技術(shù)原理
膠體金標記,實質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程,吸附原理:(1)金粒子所帶的負電荷與蛋白內(nèi)的氯基酸所帶的陽性電荷的zui初的相互吸引;(2)蛋白通過某些氨基酸殘基包括與金粒子表面之間的疏水吸附作用,儀,(3)蛋白中的半的硫基與金粒子間的配價結(jié)合。
膠體金的制備及質(zhì)量鑒定
膠體金基本都是有氯金酸還原而成,常用的還原劑有檸檬酸三鈉,抗壞血酸.白磷.等各種有機或無機化合物,根據(jù)還原劑的性質(zhì)和濃度不同,可制備各種粒徑的膠體金懸液,還原劑的濃度和還原力越高,所合成的膠體金顆粒就越小。常制備的的金粒徑大小都在5-150nm范圍,診斷進監(jiān)測用金鈪合物的顆粒直徑大多在20-40nm大小,在膠體金與蛋白質(zhì)偶聯(lián)的過程中金顆粒的品質(zhì)起著決定性作用,如果應(yīng)用劣質(zhì)的膠體金用于標記直接影響試紙條的靈敏度,穩(wěn)定性和特異性,因此膠體金讀數(shù)儀廠家提醒在標記前可應(yīng)用透射電鏡對膠體金顆粒的結(jié)構(gòu)進行評價,也可以通過顏色來判斷金溶液的質(zhì)量,常用的20-40nm的金顆粒呈深紅色,吸收波長為530nm。